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储存型液氮罐在实验室生物实验中的使用规范

时间:2018-02-06 16:52来源:班德液氮罐 作者:班德液氮罐 点击:

储存型液氮罐在实验室生物实验中的使用规范

一、细胞培养中使用液氮罐的一般程序

     细胞培养的一般过程,主要包括准备、取材、培养和冻存复苏4步。为保存细胞,细胞株如果是不易突变的情况下一定要使用液氮深冷冻存。使用常规的液相液氮罐,一般实验室使用35125口径储存型液氮罐,先将细胞处理,把含有保护剂的培养基加入冻存管内,管内放有需要冻存的细胞,利用程序降温仪,或者使用冰箱梯度降温,最后在液氮中长期保存。在-196度保存条件下,细胞保存的时间几乎是无限的。

目前美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)液氮冻存有3200个已经过鉴定的细胞系(1992),其中包括来自正常人和各种疾病患者的皮肤成纤维细胞系和来自不同物种的近75个杂交瘤细胞株。

二、胚胎冷冻保存技术

胚胎冷冻保存技术是指在低温条件下利用低温保护剂保存胚胎的一门技术。这一技术是20世纪后半叶随着人工授精技术广泛应用而产生的,目前已成为了现代生命科学研究必备的手段之一。动物胚胎的冷冻保存原理就是因为低温降低了胚胎内的变质反应速度,细胞保存的温度越低,细胞及生物样品的保存时间就越长。

目前已经有很多种生物制品细胞胚胎等的冷冻保存深冷保存方法,包括慢速冷冻法、快速冷冻法、一步冷冻法、直接移植深冷法和玻璃冷冻,超级冷冻法都可以快速冷冻

①将胚胎在室温下放人25%玻璃化溶液(VS)中预处理15min

②将预处理后的胚胎放在高浓度(75%一90)VS液中保存2040min

③将经过两步抗冻剂处理的胚胎直接投入液氮中保存。

此外还可以用液氮罐保存菌种、疫苗、骨组织、精子等物质,均可达到很好的长期存储的效果
液氮罐

 

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