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液氮罐中的菌种活化

时间:2019-10-09 10:17来源:未知 作者:班德液氮罐 点击:
液氮罐中的菌种(Bacterial species)活化是怎么回事?
  菌(fungus)种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养, 逐级扩大培养是为了 得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。液氮罐一般可分为液氮贮存罐、液氮运输罐两种。 贮存罐主要用于室内液氮的静置贮存,不宜在工作状态下作远距离运输使用; 液氮运输罐为了满足运输的条件,作了专门的防震设计。其除可静置贮存外,还可在充装液氮状态下,作运输使用,但也应避免剧烈的碰撞和震动。液氮罐使用过程中要经常检查。可以用眼观测也可以用手触摸外壳,若发现外表挂霜,应停止使用;特别是颈管内壁附霜结冰时不宜用小刀去刮,以防颈管内壁受到破坏,造成真空不良,而是应将液氮取出,让其自然融化。菌种发酵又称酦酵有一般需要 2-3 代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所 以要活化,让菌种逐渐适应培养环境(environment) 要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。
  目前国际(International)国内常用的 菌种保存方法包括(bāo kuò): 定期移植法、 液体石蜡法、 沙土管法、 真空冷冻干燥法、 80℃ 冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。
  对于不同的保存方式活化的方式也不同:
  1 定期移植法的菌种复苏较简单,直接转接即可;
  2 液体石蜡法保存的菌种在复苏时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上, 生长繁殖(fán zhí)后,再重新转接一次;
  3 沙土管法保存菌种(Bacterial species)在复苏时,在无菌(意思:没有活菌)条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适 宜的斜面培养(to cultivate)基上, 长出菌落后再转接一次。 或取沙土粒于适宜的液体(liquid)培养基中, 增殖培养后再转接斜面;
  4 真空冷冻(freezing)干燥法保存菌种在复苏时先用 70%酒精棉花擦拭安瓿上部,将安瓿 管顶部烧热, 用无菌(意思:没有活菌)棉签沾冷水,在顶部擦一圈,顶部出现裂纹,用挫刀或镊 子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端,用无菌水或培养液溶解菌块,使用(use)无菌吸管移入新鲜培养基上,进行适温培养;
  5 -80℃ 冰箱冻结法保存菌种(Bacterial species)复苏时,从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管,应 立即放置 38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为 止,约需 50 秒-100 秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将网站内容物移**适宜的培养基 上进行培养 6 液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏相似,从液氮罐(Liquid)中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在 38℃-40℃水浴中快速复苏并 适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需 50 秒-100 秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移**适宜的培养基上进行培养。
  总结一下菌种活化需要以下几个步骤(procedure):
  **配置菌(fungus)种适宜生长(Grow)的培养基
  第二将菌(fungus)种从保藏状态恢复到室温状态,比如将冷冻(freezing)的菌种解冻第三将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养,此步骤称为菌种复壮
  第四步挑选培养基茁壮的菌落,挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养,重复此步骤(procedure) 2-3 次,从而得到生长(Grow)良好的菌落
  经过这四个步骤就到达将菌种从保藏状态活化的目的
  有同学已经说的很专业(zhuān yè)了,我就给你说些简单实用的。不知道你出于何种目的要进行活化。 如果你是用冻存管保存的菌株进行活化, 取出 2 颗小珠放在适宜的固 体培养(to cultivate)基上,合上盖让小珠在平皿上滚动,适宜条件培养就可以了。长出一个菌 落,你再繁殖就可以了。如果你是冻干粉的菌种(Bacterial species),准备适宜的液体培养基,少少一点点粉末接种就可以了,根据此菌种一般液体培养所需时间,大概在 36-48h, 你还可以在观察(Observed)到液体浑浊、试管底部有沉淀(precipitation)时(沉淀者也可能为原本死亡的细 菌),取 100 微升液体涂抹(smear)在固体培养基上。 一般的话,复苏的菌种需要重复几次复壮。
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