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液氮罐中的菌种活化方式

时间:2020-03-09 09:37来源:未知 作者:班德液氮罐 点击:
菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养, 逐级扩大培养是为了 得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有 一般需要 2-3 代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所 以要活化,让菌种逐渐适应培养环境 要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。 目前国际国内常用的 菌种保存方法包括: 定期移植法、 液体石蜡法、 沙土管法、 真空冷冻干燥法、 80℃ 冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。 对于不同的保存方式活化的方式也不同: 1 定期移植法的菌种复苏较简单,直接转接即可; 2 液体石蜡法保存的菌种在复苏时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上, 生长繁殖后,再重新转接一次; 3 沙土管法保存菌种在复苏时,在无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适 宜的斜面培养基上, 长出菌落后再转接一次。 或取沙土粒于适宜的液体培养基中, 增殖培养后再转接斜面; 4 真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用 70%酒精棉花擦拭安瓿上部,将安瓿 管顶部烧热, 用无菌棉签沾冷水,在顶部擦一圈,顶部出现裂纹,用挫刀或镊 子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端,用无菌水或培养液溶解菌块,使 用无菌吸管移入新鲜培养基上,进行适温培养; 5 -80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏时,从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管,应 立即放置 38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为 止,约需 50 秒-100 秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基 上进行培养 6 液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏相似,从 液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在 38℃-40℃水浴中快速复苏并 适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需 50 秒-100 秒。开启安瓿管或 塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。 总结一下菌种活化需要以下几个步骤: **配置菌种适宜生长的培养基 第二将菌种从保藏状态恢复到室温状态,比如将冷冻的菌种解冻 第三将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养,此步骤称为菌种复壮 第四步挑选培养基茁壮的菌落,挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养,重 复此步骤 2-3 次,从而得到生长良好的菌落 经过这四个步骤就到达将菌种从保藏状态活化的目的 液氮罐

  有同学已经说的很专业了,我就给你说些简单实用的。不知道你出于何种目的要 进行活化。 如果你是用冻存管保存的菌株进行活化, 取出 2 颗小珠放在适宜的固 体培养基上,合上盖让小珠在平皿上滚动,适宜条件培养就可以了。长出一个菌 落,你再繁殖就可以了。如果你是冻干粉的菌种,准备适宜的液体培养基,少少 一点点粉末接种就可以了,根据此菌种一般液体培养所需时间,大概在 36-48h, 你还可以在观察到液体浑浊、试管底部有沉淀时(沉淀者也可能为原本死亡的细 菌),取 100 微升液体涂抹在固体培养基上。 一般的话,复苏的菌种需要重复几次复壮。液氮罐
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